Квантифероновый тест

Современная альтернатива традиционной туберкулинодиагностике

Латентная туберкулезная инфекция

По данным ВОЗ, около 30% населения мира имеют латентную туберкулезную инфекцию (ЛТИ). Это означает, что они инфицированы M. tuberculosis complex, но не имеют признаков или симптомов туберкулеза. При наличии неблагоприятных факторов, связанных в основном с состоянием иммунной системы организма, примерно в 5-10% случаях, ЛТИ у человека может перейти в активный туберкулез (ТБ) с последующим бактериовыделением и заражением остальных людей. Основная задача противотуберкулезной службы стран – выявление таких групп риска по ТБ с последующим профилактическим лечением ЛТИ.

Обследованию на наличие ЛТИ подлежат группы риска:

  • медицинский персонал
  • лица, имеющие контакт с больным ТБ
  • ВИЧ-инфицированные
  • лица, получающие цитостатическую, лучевую, системную глюкокортикостероидную терапию, иммуносупрессивные генно-инженерные биологические препараты
  • лица, находящиеся на лечении с замещением функции почек
  • мигранты из стран с высоким бременем туберкулеза
  • лица, имеющие сопутствующие заболевания, способствующие снижению иммунитета (онкология, сахарный диабет и др.)
  • пациенты с пневмокониозами
  • потребители наркотиков
  • прибывшие с мест лишения свободы

Туберкулинодиагностика (проба Манту) широко используется более 100 лет во всем мире. Однако, несмотря на широкое распространение, данный метод обладает низкой информативностью. К основным недостаткам пробы Манту относится большое число ложноположительных результатов. Кроме того, внутрикожные тесты (проба Манту и с аллергеном ТБ рекомбинантным) имеет ряд противопоказаний к применению. Поэтому в клинической практике необходимы новые иммунологические тесты для диагностики ЛТИ среди населения во всех группах риска.

Недостатки туберкулинодиагностики:

  • ложноположительный результат в следствие БЦЖ-вакцинации, аллергии и иммунной реактивности к нетуберкулезным бактериям;
  • ложноотрицательный результат у лиц с активным ТБ и иммуносупрессией;
  • сложности с правильным введением туберкулина и с последующей субъективной оценкой результата;
  • наличие противопоказаний к постановке тестов.

Противопоказания к проведению внутрикожных проб:

  • острые и хронические инфекционные заболевания (в период обострения);
  • соматические и др. заболевания в период обострения; карантин по детским инфекциям в детских коллективах (до снятия карантина);
  • кожные заболевания; аллергические состояния;
  • эпилепсия;
  • индивидуальная непереносимость туберкулина или ДИАСКИНТЕСТА®.

QuantiFERON®-TB Gold (квантифероновый тест) – это инновационный тест для in vitro диагностики латентной туберкулезной инфекции, а также инфекций комплекса M. tuberculosis у человека. В основе Квантиферонового теста используется оценка клеточного иммунного ответа у человека, инфицированного M. tuberculosis complex (метод IRGA, interferon-gamma release assay). IRGA тесты рекомендованы ВОЗ для диагностики ЛТИ, контролирующими органами США (FDA), Евросоюза (EMA), а также профессиональными ассоциациями по фтизиатрии РФ.

Квантифероновый тест обладает рядом существенных преимуществ перед кожными пробами. В многочисленных исследованиях была доказана высокая диагностическая информативность QuantiFERON®-TB Gold, что позволяет проводить диагностику ЛТИ на новом уровне.

Преимущества QuantiFERON®-TB Gold перед внутрикожными пробами:

  • высокая чувствительность и специфичность, благодаря использованию рекомбинантных белков, не содержащихся в вакцине M.bovis BCG;
  • отсутствие противопоказаний к постановке и ограничений по времени проведения – применяется у детей и подростков и во всех без исключения группах риска по ТБ;
  • безопасность процедуры (in vitro тест) и отсутствие побочных реакций;
  • интерпретация результатов с использованием программного обеспечения для исключения субъективного подхода;
  • требуется 1 визит к врачу;
  • включен в рекомендации ВОЗ.

Квантифероновый тест включает:

  • Набор реагентов QuantiFERON-TB Gold Plus (QIAGEN)
  • Набор вакуумных пробирок для забора крови QuantiFERON®-TB Gold Blood Collection Tubes (QIAGEN)
QuantiFERON®-TB Gold Проба Манту Диаскинтест
Метод исследования IGRA тест Кожная проба Кожная проба
Специфичность 99% 30% 99%
Положительные реакции у БЦЖ-вакцинированных лиц
Наличие противопоказаний и ограничений по применению отсутствуют имеются имеются
Время получения результата 20-24 ч 48-72 ч 48-72 ч
Безопасность процедуры да, отсутствие побочных действий возможны побочные действия возможны побочные действия

Принцип Квантиферонового теста

Квантифероновый тест основан на определении ИФН-γ, продуцируемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими пептидами микобактерий туберкулеза, входящих в Mycobacterium tuberculosis complex. Уровень ИФН-γ измеряется методом иммуноферментного анализа (ИФА), и для интерпретации результатов значение ИФН-γ сравнивается с контрольными.

В качестве таких антигенов используется смесь рекомбинантных пептидов ESAT-6, CFP-10 и TB7.7(p4). Гены, кодирующие данные пептиды, отсутствуют в геноме всех штаммов M. bovis BCG и у большинства нетуберкулезных микобактерий (за исключением M.kansasii, M.marinum и M.szulgai). Именно поэтому Квантифероновый тест QuantiFERON®-TB Gold обладает высокой специфичностью по сравнению с пробой Манту и не вызывает иммунных реакций, связанных с БЦЖ-вакцинацией.

Для проведения Квантиферонового теста цельная кровь забирается в специальные вакуумные пробирки. Используются 3 специальные пробирки – серая, красная и фиолетовая. Во время инкубации крови с антигенами в течение 16-24 часов происходит стимуляция Т-лимфоцитов in vitro, которые продуцируют ИНФ-γ. После процедуры получения плазмы крови, проводится количественное определение ИФН-γ методом ИФА. Весь анализ вместе с активацией Т-лимфоцитов занимает в среднем 20-24 часа.

Каждая из пробирок имеет свое назначение и позволяет определить контрольные значения для дальнейшей интерпретации результатов: Красная с антигенами (смесь пептидов) для стимуляции продукции ИНФ-γ в крови. Серая контрольная (без антигенов) для получения базального уровня ИНФ-γ. Фиолетовая (с митогеном) для оценки функционирования иммунной системы (для исключения иммуносупрессии и ложноотрицательного ответа).

Процедура постановки Квантиферонового теста

  • 1. Забор цельной крови для исследования Цельная кровь объемом 1 мл забирается в специально разработанные пробирки: с антигеном, с митогеном и в нулевую (контрольную) пробирку.
  • 2. Получение плазмы крови Центрифугирование (15 мин) и инкубирование пробирок в течение 16-24 ч, сбор плазмы для проведения анализа.
  • 3. Измерение уровня ИНФ-γ Определение ИНФ-γ в плазме крови методом ИФА с использованием любого имеющегося оборудования для ИФА.
  • 4. Анализ результатов

Информация для заказа

Каталожный номер Наименование Комментарии Количество пациентов
622120 Набор реагентов для выявления возбудителя туберкулеза in-vitro «QuantiFERON-TB Gold Plus» Количественное определение ИНФ- γ методом ИФА. Набор включает 2 микропланшета и необходимые реагенты Максимально до 56 пациентов
622526 Пробирки для забора крови «QFT-Plus (50 пробирок с ТВI/TB2/нулевым контролем/митогеном)» Специальные вакуумные пробирки, предназначенные для забора образцов цельной крови. Содержит тестовые пробирки (TB Antigen Tube), пробирки отрицательного контроля (Nil Tube), пробирки положительного контроля (Mitogen Tube) 50 пациентов
622222 Набор для одного пациента «QFT-Plus» Специальные вакуумные пробирки, предназначенные для забора образцов цельной крови. Содержит тестовые пробирки (TB Antigen Tube), пробирки отрицательного контроля (Nil Tube), пробирки положительного контроля (Mitogen Tube) в индивидуальной упаковке для каждого пациента 10 пациентов